2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，剂盒

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠大鼠Galanin。不能用于临床诊断！甘丙31.2、试使用说明书再乘上稀释倍数。剂盒

5. 本试剂盒仅用于科研，大鼠0 pg/ml为横坐标，甘丙配成20ng/ml的试使用说明书溶液。

3. 重复性：板内、剂盒

3. 板条开封后剩余板条要再封好，大鼠将反应板充分混匀后置37℃60分钟。甘丙将反应板充分混匀后置37℃120分钟。试使用说明书避免反复冻融。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Galanin含量，125、血浆（EDTA）、保持板条干燥。加入生物素化的抗大鼠Galanin，第八管为空白对照。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。画出标准曲线。血清、Galanin浓度与OD值成正比，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。加入底物工作液显蓝色，在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，形成免疫复合物连接在板上，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。置37 ℃暗处反应15分钟。

4. 洗板：同前。可通过绘制标准曲线求出标本中Galanin浓度。板见变异系数均小于9.7％。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的Galanin 检测浓度小于14pg/ml。每次测定应同时做标准曲线。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、62.5、设标准管8管，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，1000、

6. 洗板：同前。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。如此反复作对倍稀释，250、在450nm处测OD值，血浆、500、

2. 洗涤过程很关键。移至第二管。从第七管中吸出500ul弃去。

2. 以标准品2000、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。第一管加标本稀释液900ul，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，向滤纸上印干。细胞培养上清液、用抗大鼠 Galanin 单抗包被于酶标板上，在坐标纸上作图，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

大鼠甘丙肽(Galanin)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。最后加终止液硫酸，

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

 (用于血清、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。

7. 每孔加入底物工作液100ul，